2016-1116
單克隆技術又名雜交瘤技術。由G.K?hler和Milstein1975年創立。主要原理是利用產生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。單克隆抗體的制備過程主要有以下六個環節,具體為抗原指標、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細胞雜交與選擇培養。下面詳細介紹單克隆抗體制備過程每一步的做法。1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原,從純度上說雖不要求很高,但高純度的抗原使得到所需單抗的機會增加,同時可以減輕篩選的工作量。因此,免疫抗原是越純越好,應根據所研究的抗原和...
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2016-1115
內參抗體種類很多,比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等,那么針對自己的實驗,我們該如何選擇呢?下面簡單介紹下選擇內參抗體應遵循的原則:一.樣本種屬來源:先要考慮的就是實驗樣本來源于什么物種。1、哺乳動物的組織或者細胞樣本,通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實驗樣本,則可以選擇plantactin、Rubisco等。3、其他來源樣本研究...
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2016-1114
試劑盒提取植物dna已經獲得廣泛應用。各個生化試劑廠家也都有了dna提取試劑盒產品。索萊寶作為國內生化試劑供應商提供了各類dna提取試劑盒。今天給大家介紹試劑盒提取植物dna步驟。當然是以索萊寶產植物基因組dna提取試劑盒產品為例。使用前先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。1、植物組織預處理:取新鮮植物組織(不超過100mg)或干重組織(不超過20mg),于液氮中充分研磨細粉狀,讓液氮自然揮發。2、將研磨好的植物組...
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2016-1114
酵母質粒提取可以用試劑盒提取,也可以直接用裂壁酶處理后采用堿裂解法提取質粒。推薦使用索萊寶供應的酵母質粒提取試劑盒,無需使用酚、CCL4等有毒試劑,操作安全。下面我們就用索萊寶酵母質粒提取試劑盒為例講解酵母質粒提取方法和步驟。1.接種單菌落(待檢測酵母細胞)于25mLYNB(補加氨基酸營養物)培養基中,30℃振蕩培養隔夜。2.第二天取一滴菌液于進行顯微鏡下觀察,目鏡用16,物鏡用40倍觀察細胞壁破碎前的狀態,其成桿狀,流動性比較下.3.取10ml的培養酵母菌液,5000g離心...
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2016-1114
dna提取是一項經常要做的實驗,下面我們就總結了四種dna提取方法并做詳細說明和比較。一.濃鹽法提取dna:A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同,將二者分離,常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL4一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質,此時蛋白質凝膠停留在水相及CCL4相中間,而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15MNaCL液反復洗滌細胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白...
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2016-1114
問題1:使用瓊脂粉配置的MS培養基顏色明顯變黃?影響實驗?產品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質量問題,不影響使用。進口產品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?,F象。問題2:凝膠強度?答:凝膠強度(1.5%)≥800g/cm2800-1200g/cm21.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時以上,再測定凝膠強度。與溫度,水質等有關。一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時間久,可能會有部分降解,所以要達到同樣凝膠...
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2016-1114
培養基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養料。一般分為天然培養基、組合培養基、固體培養基、液體培養基等,那我們常用的剛果紅培養基屬于哪一類的?剛果紅培養基屬于哪一類培養基:剛果紅培養基屬于固體培養基,因為后能在培養基上看到因分解纖維素形成的透明圈,在液體培養基中不可能形成透明圈.是鑒定培養基,因為該培養基上也能生長其他微生物,例如有些自養型微生物就能在該培養基上生存;不過只有纖維素分解菌周圍才會形成透明圈,從而將該菌落鑒定出來.也是區分選擇培養基,例如在配...
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2016-112