2016-120
免疫細胞的分離技術外周血單個核細胞的分離用體外方法對機體各種具有免疫反應的細胞分別作鑒定、計數和功能測定,是觀察機體免疫狀態的一種重要手段。為此,須將各種參與免疫反應的細胞從血液或臟器中分離出來。參與免疫反應的細胞主要包括淋巴細胞、巨噬細胞、中性粒細胞等。實驗根據不同需求有的僅需分離白細胞,有的則需分離單個核細胞(mononuclearcell),其中含淋巴細胞和單核細胞(monocyte),有的則需分離T細胞和B細胞以及其亞群。白細胞包括以下細胞外周血中單個核細胞包括淋巴細...
查看更多
2016-15
DNALoadingBuffer貨號:D1010規格:5ml/100ml保存:室溫保存,有效期少12個月。產品簡介:本產品是6倍濃縮的DNA上樣緩沖液,用于DNA凝膠電泳,能促使DNA樣品沉入凝膠加樣孔中。其主要成份為甘油,EDTA,溴酚藍和二甲苯青等。溴酚藍和二甲苯青用作電泳時的指示劑,可指示電泳進程。使用說明:1、請按每5微升DNA樣品加入1微升6×DNALoadingBuffer上的比例(6倍稀釋)來使用。2、混勻后,直接加到DNA凝膠加樣孔中,電泳。注意事項:1、如果...
查看更多
2015-1219
一抗體稀釋,主要用來稀釋*抗體,稀釋過的一抗可4度保存3-6個月。主要含有蛋白穩定劑,PBS,疊氮鈉等,不適合于稀釋酶標記抗體及待標記抗體。酶標抗體稀釋液只適合于稀釋對應的抗體,稀釋過的抗體可4度保存3-6個月。熒光抗體稀釋液稀釋過的熒光抗體可4度避光保存一周。免疫熒光抗體稀釋液(ImmunofluorescenceStainingAntibodyDilutionBuffer)可以用于免疫熒光實驗時熒光標記抗體的稀釋和配制。產品添加了抗體保護劑、穩定劑等成分,有效增加了稀釋后...
查看更多
2015-121
WB常見問題常見問題解決對策及注意事項兩快玻璃板之間灌膠,膠總是不平玻璃沒有洗干凈,應該要洗得非常干凈過硫酸銨和TEMED的加量不合適,加量相對較多,凝膠凝固過快,也會造成膠不平現象加完試劑以后沒有很好的搖勻,導致有些部位的聚合劑濃度過高,聚合相對較快造成膠不平膠總是漏避免玻璃邊緣(與膠條接觸處)破損膠條一定要干,跑完電泳后,膠條就放在實驗臺上晾著。下面的膠條注意不要老化,如果有裂紋的話用保鮮膜墊在上面,也可以有效防止漏膠將兩塊玻板擺放*對齊,底部處于同一個平面膜上有明顯氣泡...
查看更多
2015-121
轉印緩沖液提供了電極之間的電連續性,其必須是導電的。它還提供了一個化學環境,能維持蛋白質的溶解度,又不妨礙轉移過程中蛋白質吸附到膜上。傳統的轉印緩沖液包含緩沖系統和甲醇。Tris甘氨酸緩沖液,常用于槽轉印系統中。這種緩沖液的pH值為8.3,比大多數蛋白的等電點(pI)要高。在凝膠上分離的蛋白質帶負電荷,向陽極遷移。由于槽內的緩沖液是混合的,故轉移過程中的離子分布保持相對恒定。在蛋白測序應用中,建議使用10mMCAPS緩沖液(pH=11)。凝膠電泳緩沖液中殘留的甘氨酸導致蛋白測...
查看更多
2015-121
轉印膜:用于蛋白質和核酸的轉移和檢驗過程的微孔膜。Southernblot:又稱Southern印跡雜交,是研究DNA圖譜的基本技術。Northernblot:又稱Northern印跡雜交,是檢測RNA的基本技術。Westernblot:又稱Western印跡雜交,是蛋白質檢測分析的基本技術。轉印膜在蛋白質和核酸的轉移和檢測過程中應用廣泛,不同的轉印膜規格和參數不同,選擇正確、均一穩定的轉印膜對達到的實驗結果起到關鍵性的作用。常用的三種轉印膜:硝酸纖維素膜(NC膜)、帶正電的...
查看更多
2015-121
單克隆技術又名雜交瘤技術。由G.K?hler和Milstein1975年創立。主要原理是利用產生抗體的B細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞,生產抗體。單克隆抗體的制備過程主要有以下六個環節,具體為抗原指標、免疫動物選擇、免疫程序的確定、免疫、細胞雜交與選擇培養。單抗制備步驟1、抗原制備制備單克隆抗體的免疫抗原,從純度上說雖不要求很高,但高純度的抗原使得到所需單抗的機會增加,同時可以減輕篩選的工作量。因此,免疫抗原是越純越好,應根據所研究的抗原和實驗室的條件來決定。2、免疫動物...
查看更多
2015-121
一、HRP辣根過氧化酶是常見的酶促發光或顯色的交聯酶,由于HRP比活高、特異性更強、分子量小(40kD)、穩定性好和作用底物范圍廣的優點而得到廣泛使用。HRP的底物種類有不少,主要可以分為化學發光底物和生色底物2大類:1.化學發光底物:化學發光底物主要考慮的是:發光信號強弱——發光信號當然越強越好,強發光信號持續的時間也是越長越好,還有就是背景低靈敏度高。原理:試劑中的發光物在辣根過氧化物酶的作用下發生氧化降解,并發射波長為428nm的光,此光可經x光膠片(放射自顯影片)感光...
查看更多