熒光染料在流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)中的分類(lèi)

更新時(shí)間：2023-02-01

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　　在流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)發(fā)展的幾十年中，熒光成為了其發(fā)展軌跡上重要代名詞之一。在流式細(xì)胞檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)用各種熒光素標(biāo)記抗體是必不可少的。那么常用的流式熒光染料有哪些呢？

　　一、有機(jī)小分子

　　這類(lèi)染料是具有歷史、應(yīng)用廣泛且相對(duì)較小的熒光化合物。有了國(guó)外研究基礎(chǔ)，國(guó)內(nèi)公司也陸續(xù)開(kāi)始擁有自己專(zhuān)屬染料。

　　二、藻膽蛋白

　　從各種藻類(lèi)中提取的大蛋白分子。與化學(xué)合成熒光染料相比，藻膽蛋白熒光量子產(chǎn)率超過(guò)90％、具備相對(duì)高的消光系數(shù)，且能夠發(fā)出強(qiáng)烈熒光信號(hào)。

　　在聚合物染料沒(méi)出現(xiàn)之前，PE和APC是亮的染料，也是搭配低豐度抗原選擇。不過(guò)，藻膽蛋白很容易受光漂白影響，因此不推薦長(zhǎng)時(shí)間或反復(fù)暴露于激發(fā)源的應(yīng)用。

　　三、串聯(lián)染料

　　一個(gè)具有供體染料分子的激發(fā)和受體染料分子的發(fā)射性質(zhì)的獨(dú)特?zé)晒饣鶊F(tuán)。利用熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）的現(xiàn)象，即兩個(gè)熒光分子中供體的發(fā)射光譜與受體的激發(fā)光譜重疊，且位置上距離很近時(shí)，會(huì)產(chǎn)生能量的轉(zhuǎn)移情況，此時(shí)供體熒光分子的熒光信號(hào)發(fā)生淬滅，而受體熒光分子的熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。

　　比起單分子染料，串聯(lián)染料不僅在熒光亮度上明顯增強(qiáng)，還可在單一激發(fā)器中實(shí)現(xiàn)更大的發(fā)射波長(zhǎng)，使得檢測(cè)紅外區(qū)域的光譜成為可能。一個(gè)激發(fā)光源就可以使用多個(gè)染料進(jìn)行研究，這依賴于串聯(lián)染料擴(kuò)展斯托克斯位移值（150-300nm），即激發(fā)與發(fā)射波長(zhǎng)的差值。

　　隨著科研、IVD領(lǐng)域技術(shù)勢(shì)頭飛速發(fā)展，儀器不斷地迭代更新，流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)手段已經(jīng)十分成熟，僅僅單激光、單通道的流式分析，已經(jīng)不能滿足科研人員需求，目前的單激光、多通道流式檢測(cè)技術(shù)，無(wú)論在免疫療法、細(xì)胞分選、生物制藥等其它領(lǐng)域都受到高度青睞。

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