衍生化試劑盒（Derivatization Kit）是一種預(yù)先配制好的實(shí)驗(yàn)工具包（基于C18色譜柱研發(fā)的方法），包含特定化學(xué)試劑、HPLC中被檢測(cè)物質(zhì)的所需流動(dòng)相、反應(yīng)條件說(shuō)明和操作流程，用于對(duì)待測(cè)化合物（如氨基酸、糖類(lèi)、生物胺等）進(jìn)行化學(xué)衍生化處理（不包含從原料中提取目標(biāo)物質(zhì)的提取液）。其核心目的是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)在目標(biāo)物質(zhì)結(jié)構(gòu)上引入特定功能基團(tuán)，以增強(qiáng)其檢測(cè)靈敏度、穩(wěn)定性或色譜分離性能。

工作原理

衍生化的本質(zhì)是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)改變目標(biāo)物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，通常分為以下步驟：

選擇衍生化試劑

根據(jù)目標(biāo)物質(zhì)和檢測(cè)需求選擇試劑（如丹磺酰氯、鄰苯二甲醛）。

反應(yīng)條件控制

pH調(diào)節(jié)：例如，氨基酸衍生化需在堿性條件下進(jìn)行。

溫度與時(shí)間：加熱加速反應(yīng)。

反應(yīng)類(lèi)型

酰化反應(yīng)：引入酰基

烷基化反應(yīng)：增加揮發(fā)性。

熒光標(biāo)記：丹磺酰氯與伯胺反應(yīng)生成熒光衍生物。

終止：通過(guò)調(diào)節(jié)pH或加入終止劑（如鹽酸）停止反應(yīng)。

示例

氨基酸分析：使用鄰苯二甲醛（OPA）在堿性條件下與伯胺反應(yīng)，生成熒光產(chǎn)物，便于HPLC-FLD檢測(cè)。

衍生化試劑盒功能與應(yīng)用

01 功能

提高檢測(cè)靈敏度：通過(guò)引入熒光基團(tuán)、紫外吸收基團(tuán)或電化學(xué)活性基團(tuán)，使原本難以檢測(cè)的化合物（如無(wú)紫外吸收的糖類(lèi)）可被儀器（如HPLC、GC、LC-MS）識(shí)別。

改善分離性能：增加化合物的揮發(fā)性（用于GC）或極性（用于HPLC），優(yōu)化色譜分離效果（不用特定的氨基柱、糖分析柱，用C18色譜柱也能對(duì)物質(zhì)進(jìn)行精準(zhǔn)定性定量）。

保護(hù)不穩(wěn)定化合物：對(duì)易氧化、易水解的分子（如某些藥物代謝物）進(jìn)行衍生化，提高其穩(wěn)定性。

標(biāo)準(zhǔn)化操作：簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程，減少人為誤差，適用于高通量檢測(cè)。

02 應(yīng)用實(shí)例

玉米中的氨基酸分析：將玉米中的氨基酸提取出來(lái)，然后將提取物通過(guò)衍生化試劑盒衍生，然后進(jìn)行高效液相檢測(cè)。