植物蛋白提取試劑盒介紹

植物原生質體是指脫去全部細胞壁由質膜包被的具有生命活力的裸露細胞。它具有細胞生命特征和全能型，是細胞無性系變異和突變體篩選的重要來源，同時也是植物遺傳工程的理想受體和遺傳改良的理想材料。
酶解法分離原生質體是一個常用的技術，其原理是植物細胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質組成，因而使用纖維素酶、半纖維素酶、離析酶和果膠酶能降解細胞壁成分，去除細胞壁，即可得到原生質體。許多方法可誘導原生質體融合，現在被廣泛采用的融合方法是聚乙二醇（PEG）法。
聚乙二醇（PEG）作為一種高分子化合物，合適的濃度能對原生質體產生瞬間沖擊效應，原生質體很快發生收縮與粘連，隨后用高鈣高pH法進行清洗，使原生質體融合得以完成。

植物蛋白提取試劑盒操作步驟：

1、植物組織蛋白的提取

1) 取 100-200mg 的植物組織放入液氮中（過夜），在液氮環境中將植物組織碾碎（越碎越好）；

2) 加入 1ml 的裂解液（加入 10µL 蛋白酶抑制劑和 10µL PMSF），4 oC 裂解 20min，期間隔 5min 震蕩 1 次；

3) 4 oC，14000 轉離心 30min；

4) 吸取上清新的管中；

2、進行蛋白定或者變性進行蛋白實驗。

（提取好的蛋白建議保存于-80 oC，即用即取，避免反復凍融，避免長時間儲存。)

注意事項：

1. 實驗過程，所有試劑都要需要預冷或者即融，保證操作過程中的低溫環境；

2. PSMF（有毒）現用現加，因為 PMSF 在水溶液中會快速降解；

相關文獻：

《Proanthocyanidins Protect against β-Hydroxybutyrate-Induced Oxidative Damage in Bovine Endometrial Cells》 作者:Xi Cheng,Shuhua Yang,Chuang Xu, Lanzhi Li,Yi Zhang, Yang Guo, Cai Zhang, Peng Li, Miao Long,Jianbin He 期刊:Molecules. 影響因子:3.098 PMID:30678309
《Luteoloside attenuates neuroinflammation in focal cerebral ischemia in rats via regulation of the PPARγ/Nrf2/NF-κB signaling pathway》 作者:Qiaoling Li,Zixia Tian,Minghui Wang,Jiejian Kou,Chunli Wang,Xuli Rong,Jing Li,Xinmei Xie,Xiaobin Pang 期刊:International Immunopharmacology 影響因子:3.361 PMID:30502652
《l-Proline Alleviates Kidney Injury Caused by AFB1 and AFM1 through Regulating Excessive Apoptosis of Kidney Cells》 作者:Huiying Li , Songli Li, Huaigu Yang ,Yizhen Wang , Jiaqi Wang , and Nan Zheng 期刊:Toxins 影響因子:3.895 PMID:30995739


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