北京索萊寶科技
專注于生物學試劑及試劑盒領域
服務熱線：18101056239
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產品型號：BC2230-50T/24S
更新時間：2024-04-08
廠商性質：生產廠家
訪 問 量 ：4086
010-50973130
產品分類
L-乳酸（L-LA）含量檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC2230
規格：50T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
| 提取液一 | 液體30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 提取液二 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 液體60 μL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 液體24mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 粉劑×1瓶 | -20℃保存 |
| 試劑五 | 液體5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑二：臨用前按試劑二（V）：蒸餾水（V）=10μL：450μL的比例配制試劑二溶液，現用現配；
試劑四：臨用前每瓶加入8 mL 蒸餾水混勻，可分裝后-20℃保存，避免反復凍融，-20℃保存4周；
標準品：臨用前加入1.04 mL蒸餾水配成100 μmol/mL 的標準溶液；2-8℃保存4周。
產品說明：
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質代謝及細胞內能量代謝密切相關，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成*酸，同時使NAD+還原生成NADH和H+，H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原MTT生成紫色物質，在570nm處有特征吸收峰。
技術指標：
低檢出限：0.0387 μmol/mL
線性范圍：0.039-1 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
天平、研缽/勻漿器、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋或者恒溫培養箱、乙醇和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
注意事項：
如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
提取液一中含有蛋白質沉淀劑，因此上清液不能用于蛋白濃度測定。如需測定蛋白含量，需另取樣本。
實驗實例：
取0.1g兔心加入1mL提取液一進行勻漿研磨離心，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清后稀釋5倍，之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=1.137-0.125=1.012，根據標準曲線y=0.7826x+0.0215，計算x=1.266，按樣本質量計算含量得：
L-LA含量（μmol/g 質量）=1.1875×x÷W×稀釋倍數= 1.1875×1.266÷0.1×5=75.17 μmol/g質量。
取100μL小鼠血清加入1mL提取液一，取0.8mL上清后加0.15mL提取液二，離心取上清，之后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=1.152-0.407=0.745，根據標準曲線y=0.7826x+0.0215，x=0.924，按照液體體積計算含量得：
L-LA含量（μmol/mL）= 13.0625×x=13.0625×0.924=12.07 μmol/mL。
相關發表文獻：
Meixi Peng,Dan Yang,Yixuan Hou,et al.Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion and metastasis. Cell Death and Disease. March 2019;(IF5.959)
Xiaojin Luo,Weihua Shi，Haoming Yu,et al. Wearable Carbon Nanotube-Based BioSensors on Gloves for Lactate. Sensors. October 2018;(IF3.031)
Zhou F, Du J, Wang J. Albendazole inhibits HIF-1α-dependent glycolysis and VEGF expression in non-small cell lung cancer cells[J]. Molecular and cellular biochemistry, 2017, 428(1-2): 171-178.
參考文獻：
[1] Jin Bingjun, Li Taiyuan, Zhang Chunfeng. Determination of lactic acid concentration in bovine blood by enzymatic method [J]. Chinese Journal of Veterinary Medicine, 1990, 16(07): 23-25. [2] Eolbergrová J, MacMillan V, Siesj? B K. The effect of moderate and marked hypercapnia upon the energy state and upon the cytoplasmic NADH/NAD+ ratio of the rat brain[J]. Journal of neurochemistry, 1972, 19(11): 2497-2505.
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