有效期
6個月
儲存條件
-20℃
單位
盒
英文名稱
Acetyl Co-A Content Assay Kit
檢測方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
乙酰輔*A含量檢測試劑盒
規格
50T/48S ; 25T/24S

產品型號：BC0980

更新時間：2024-04-15

廠商性質：生產廠家

訪問量：1930

服務熱線

010-50973130

立即咨詢

產品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質羥自由基清除能力檢測植物銨態氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

查看全部產品

結晶紫指示劑變色范圍是多少

豬戊型肝炎病毒抗體（HEV Ab）ELISA試劑盒使用說明書

細胞檢測試劑優勢特點眾多，你還不來了解一下！

人抗胰蛋白酶elisa試劑盒在消化系統疾病研究中的作用

蛋白質泛素化機制研究新進展

產品介紹

乙酰輔*A含量檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法
注意：本產品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC0980
規格：25T/24S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶配內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

試劑名稱	規格	保存條件
提取液一	液體30 mL×1瓶	2-8℃保存
提取液二	液體300 μL×1支	-20℃保存
試劑一	粉劑×1支	-20℃保存
試劑二	液體10 μL×1支	2-8℃保存
試劑三A	液體25 mL×1瓶	2-8℃保存
試劑三B	粉劑×1瓶	-20℃保存
試劑四	液體5 mL×1瓶	2-8℃保存

溶液的配制：

試劑一：臨用前加入325μL試劑四，充分溶解；用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
試劑二：臨用前取1支先將液體甩離至管底，然后加入250μL試劑四，充分溶解；用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
試劑三：臨用取試劑三B加入24mL試劑三A，充分溶解；用不完的試劑-20℃分裝保存2周，避免反復凍融；
工作液：臨用前將試劑一、二和三按照1:1:90的比例混合，根據樣本量現配現用。

產品說明：
乙酰輔*A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是生物體能源物質代謝過程中產生的一種重要的中間代謝產物，在體內能源物質代謝中是一個樞紐性的物質。糖、脂肪、蛋白質三大營養物質通過乙酰輔*A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環和氧化磷酸化，經過這條通路氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰輔*A是合成脂肪酸、酮體、膽*醇及其衍生物等生理活性物質的前體物質。
蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD⁺生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔*A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔*A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯反應，乙酰輔*A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反應了乙酰輔*A含量的高低。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計、天平、水浴鍋/恒溫培養箱、臺式低溫離心機、1mL石英比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水。
操作步驟：

樣本處理

組織：建議稱取約0.1g樣本，加入0.99mL提取液一和0.01mL提取液二進行冰浴勻漿。于4℃，8000g離心10min，取上清，置于冰上待測。
細胞或細菌：建議取500萬細胞或細菌加入0.99mL提取液一和0.01mL提取液二，冰浴超聲波破碎細胞或細菌（功率200w，超聲3秒，間隔10秒，重復30次），于4℃，8000g離心10min，取上清，置于冰上待測。
血清（漿）或其他液體：直接檢測，若液體有渾濁則離心后測定。

二、測定步驟

紫外分光光度計預熱30min以上，調節波長至340nm，蒸餾水調零。
將工作液37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）預熱10min。
取200μL樣本和820μL工作液至1mL石英比色皿，混勻，立即記錄340nm處20s的吸光值A1和80s時的吸光值A2，計算ΔA=A2-A1。

乙酰輔*A含量計算

按樣本質量計算

乙酰輔*A含量（nmol/g 質量）＝(ΔA÷ε÷d)×V反×10⁹÷V樣×V提÷W×F=819.9×ΔA÷W×F

按照細胞數量計算

乙酰輔*A含量（nmol/10⁴ cell）＝(ΔA÷ε÷d)×V反×10⁹÷V樣×V提÷500×F=1.640×ΔA×F

按液體體積計算
乙酰輔*A含量（nmol/mL）＝(ΔA÷ε÷d)×V反×10⁹÷V樣×F=819.9×ΔA×F

ε：NADH摩爾消光系數，6.22×10³L/mol/cm；d：比色皿光徑，1cm；10⁹：單位換算系數，1mol=10⁹nmol；V反：反應總體積，1.02×10^-3L；V樣：加入樣本上清體積，0.2mL；V提：加入提取液一和提取液二的總體積，1mL；W：樣本質量，g；500：細胞或細菌數量，500萬；F：稀釋倍數。
實驗實例：

稱取0.1g鼠腎加入0.99mL提取液一和0.01mL提取液二進行勻漿研磨，離心后取上清，按照測定步驟操作，用1mL石英比色皿測得計算ΔA= A2-A1=0.667-0.745=0.078，按樣本質量計算酶活得：乙酰輔*A含量（nmol/g 質量）＝819.9×0.078÷0.1=639.5 nmol/g 質量。

相關系列產品：
BC0710/BC0715 α-酮戊二酸脫氫酶（α-KGDH）活性檢測試劑盒
BC2150/BC2155 檸檬酸（CA）含量檢測試劑盒
BC0950/BC0955 琥珀酸脫氫酶（SDH）活性檢測試劑盒
BC0380/BC0385 丙酮酸脫氫酶（PDH）活性檢測試劑盒
BC2160/BC2165 線粒體異檸檬酸脫氫酶（ICDHm）活性檢測試劑盒